• 歡迎來到湛江博康海洋生物有限公司! 設為首頁 加入收藏 聯系方式 English

    博康海洋生物

    藥品檢驗

    聯系方式

    湛江博康海洋生物有限公司
    地址:湛江市麻章區瑞云南路188號
    郵編:524094
    電話:0759-2732298
    電話:0759-2732299
    郵箱:bokanghy@163.com

    應用研究
    細菌內毒素微膠粒的解聚
    Date: 2017-07-18 16:40:33

       細菌內毒素(endotoxin)由革蘭氏陰性菌所產生、存在于菌體內的一類毒素,是菌體細胞壁的組成成分。細菌在生活狀態時不釋放,只有當菌體自溶或用人工方法使細胞裂解后才可釋放出來,它不是細菌的代謝產物。細菌內毒素的化學成分是磷脂-多糖-蛋白質復合物,其中主要成分是脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),位于細胞壁的最外層,覆蓋在細胞壁的粘肽上。脂多糖由三部分組成:O-特異性鏈、核心多糖和類脂A。
         O-特異性鏈:向外由若干個低聚糖的重復單位組成的多糖鏈,具有特異性。
         核心多糖:分為內核心及外核心,外核心由數種單糖,包括葡萄糖、半乳糖、乙酰氨基葡萄糖等組成。內核心含有庚糖及特殊的KDO(3-脫氧-D-甘露糖-辛酮糖)。KDO以不耐酸的酮糖鍵與類脂A的氨基葡萄糖連接。所有G-菌都有此結構。
         類脂A:位于最外層,具有致熱作用,是細菌內毒素的毒性成分。游離的類脂A含有疏水性的中心及親水性的邊緣,是一種雙相分子,可自身凝集成高分子的復合物,其分子量大小不等。
         LPS是由親水性的多糖和疏水性的類脂A結合構成的一種兩性大分子物質。在LPS分子內,親水性基團與疏水性基團在空間結構上位于分子兩端,因此,在極性溶媒和非極性溶媒中均能形成微粒樣多聚體。在水溶液中形成的LPS微膠粒,疏水性的類脂A位于多聚體的內部,親水性的多糖位于多聚體的外側(而在脂溶性的溶劑中則相反),其分子量可增大到1×108,在電鏡下呈清晰的微膠粒。在水溶液中,由于多聚體親水表面富含酸性基團,使得高分子LPS多聚體帶有負電荷。因此,LPS微膠粒能與溶媒中的Mg2+、Ca2+結合,從而增強了LPS微膠粒的結構穩定性。表面活性劑與溶媒中的Mg2+、Ca2+可影響LPS微膠粒的聚合狀態。通常在無表面活性劑存在 的溶液中,LPS多聚體的分子量超過1×106;在 表面活性劑存在時,LPS多聚體被解聚成(1~2)×104的微膠粒。
         LPS的集聚程度對于其生物學活性有非常顯著的影響。在測定LPS的活性時,必須以LPS溶解狀態為前提。在水溶液中形成的LPS微膠粒,由于其主要活性部分類脂A不暴露于水溶液中,因此必須采用一系列的方法使LPS多聚體解聚。
         對于某種特定的LPS,由于集聚程度的不同,生物學活性可強弱不一。低集聚度的LPS分子表現較強的毒性。相反,高集聚狀態的LPS多聚體,由于易被細胞吞噬清除,表現出較低的毒性。不同方法提取的LPS毒性強弱不等,酸法提取的LPS,由于部分a-糖苷鍵被裂解,形成較多游離的類脂A,因此,酸法抽提的LPS毒性較酚法提取的低。LPS其他生物學活性,如致有絲分裂反應及鱟試劑凝集反應等活性,也受到LPS集聚程度的影響,聚合狀態的LPS不能與鱟試劑發生凝集反應,必須通過各種方法將其解聚,變為LPS單體才能較好地使鱟試劑凝集。
         在LPS標準品溶解時,往往不能確定其微膠粒狀態是否被完全解聚,用旋渦振蕩器一般可以達到解聚的目的。如有條件可用20KHZ左右的聲波對LPS微膠粒進行解聚,通過此種方法可得到均勻分布的LPS單體溶液,但此種單體溶液在溶液中僅能維持約10min左右。

    上一篇:關于細菌內毒素檢查法中幾個問題的探索
    下一篇:鱟法測定細菌內毒素影響因素的研究進展

    ?
    展開
    小胖妞在线视频免费观看,深夜国产一区二区免费福利,唐朝av高清大片免费观看,国产精品理论手机在线观看,日韩欧美Tⅴ一中文字暮,2020日本男人的天堂在线,俄罗斯一级毛片真人免费视频,92国产福利午夜小视频,国产2020丝袜女王精品视频,欧美视频无砖专区一中文字目,日本成本人片高清久久免费